실험실 검사 결과가 공급업체의 COA와 일치하지 않을 때: 식물성 원료 검사에 대한 실용 가이드

한 식물성 원료가 98.0%의 함량을 나타내는 분석 증명서와 함께 도착했습니다. 귀사의 실험실에서 해당 물량을 검사한 결과, 95.1%로 보고되었습니다.

해당 시료를 거부해야 할까요, 교체해 달라고 요청해야 할까요, 아니면 분석을 다시 진행해야 할까요?

먼저, 두 실험실이 동일한 측정 기준을 적용하여 동일한 특성을 측정했는지 확인해야 합니다. 시료 전처리, 기준 물질, 여과 및 계산 방법의 차이로 인해 겉보기에는 모순되는 결과가 나올 수 있습니다.

이 안내서에서는 결론을 내리기 전에 무엇을 확인해야 하는지, 그리고 실험실 장비, 유리 기구 및 소모품이 조사에 어떤 영향을 미치는지 설명합니다.

편집자 주: 창홍 화학(Changhong Chemical)과 롱창 화학(Longchang Chemical)은 동일한 기업 그룹 산하의 계열사입니다.

1. 보고된 백분율이 무엇을 의미하는지 확인하세요

수치를 비교하기 전에, 그 정의부터 비교해 보십시오.

“HPLC를 이용한 98%”와 같은 항목은 몇 가지 의문을 남깁니다:

• 이 수치는 크로마토그래피 면적 백분율을 나타내는 것입니까, 아니면 정량 분석 결과입니까?
• 이 결과는 수령 상태, 건조 상태, 아니면 무수 기준으로 보고된 것입니까?
• 이것은 특정 화합물 하나를 설명하는 것입니까, 아니면 여러 화합물을 묶어 설명하는 것입니까?
• 그건 사양 한계치인가요, 아니면 해당 배치에 대한 측정 결과인가요?

제품 사양서는 인수 요건을 명시합니다. 배치별 COA는 특정 로트에 대한 검사 결과나 적합성 진술서를 기록합니다. 이 문서들은 각기 다른 목적을 가지고 있습니다.

가상의 예시: 98.0%와 95.1%는 호환될 수 있습니다.

어떤 물질이 다음과 같은 특성을 가지고 있다고 가정합시다:

해당 방법에 물 보정만 필요한 경우, 그 관계식은 다음과 같습니다:

수령 시 함량 = 무수 함량 × (1 − 수분 함량)

98.0% × 0.970 = 95.06%

이 단순화된 예에서, 약 95.1%라는 결과가 반드시 98.0%와 모순되는 것은 아닙니다. 이러한 겉보기상의 차이는 보고 기준에 기인합니다.

이 계산은 예시일 뿐, 특정 상용 제품의 결과를 나타내는 것이 아닙니다. 이 계산은 크로마토그래피 면적 백분율이나 다른 보정이 필요한 방법에는 적용해서는 안 됩니다.

또한, 건조 손실을 수분 함량으로 자동적으로 대체해서는 안 됩니다. 건조 손실에는 다른 휘발성 물질이 포함될 수 있는 반면, 칼 피셔 분석법은 시료에 적절히 적용될 경우 수분만을 구체적으로 측정합니다. 사르토리우스(Sartorius)가 이 차이점을 설명합니다.

2. 기기 문제 해결에 앞서 시료를 확인하십시오.

먼저 추적 가능성부터 시작합시다.

공급업체의 COA, 용기 라벨 및 귀사의 실험실 기록에 기재된 로트 번호와 등급이 동일한지 확인하십시오. 그런 다음 시험 시료가 어떻게 채취되고 취급되었는지 검토하십시오.

물어볼 만한 질문으로는 다음과 같은 것들이 있습니다:

• 시료는 적절한 시료 채취 계획에 따라 채취되었습니까?
• 서브샘플링을 수행하기 전에 필요한 혼합 작업이 이루어졌습니까?
• 컨테이너가 습기나 부적절한 보관 환경에 노출되었습니까?
• 공급처와 수령 실험실에서 채취한 시료는 서로 다른 시기에 채취된 것입니까?
• 조사를 위해 보관된 시료가 있습니까?

한 작은 부분을 반복해서 검사한다고 해서 그 부분이 해당 선적 물량을 대표하는지 여부를 확인할 수는 없습니다.

다른 용기를 개봉하거나 추가 용액을 조제하기 전에 시료 채취 및 보관 이력을 기록해 두십시오. 이 정보는 시료 채취상의 문제와 분석 결과의 차이를 구분하는 데 도움이 됩니다.

3. 계량과 희석의 연계 학습

분석기에 도달하는 농도는 각 전처리 단계에 따라 달라집니다.

가독성의 균형은 최소 시료 중량이 아닙니다.

0.1 mg까지 표시되는 저울이라고 해서 모든 소량 시료에 대해 자동으로 허용 가능한 정확도를 보장하는 것은 아닙니다. 이 저울의 최소 사용 가능 중량은 실제 작동 조건에서의 성능과 측정에 허용되는 불확실성에 따라 달라집니다. METTLER TOLEDO는 이러한 요인들을 설명하고 있습니다.

시료와 기준 시료 모두 저울의 적정 측정 범위 내에서 계량되었는지 확인하십시오.

또한 다음을 확인해 보세요:

• 정전기, 바람, 그리고 불안정한 측정값.
• 계량 중 수분 흡수.
• 계량 용기나 이송 도구에 남아 있는 물질.
• 녹음된 미사 본문에서 발견된 오기.

유리 용기도 측정 대상의 일부로 간주하십시오

정량적 조제를 위해서는 해당 방법과 요구되는 정확도에 적합한 부피 측정 기구를 사용해야 한다.

플라스크의 부피, 피펫 설정, 희석 순서 및 단위를 확인하십시오. 필요한 모든 이송이 정량적으로 이루어졌는지, 그리고 용액들이 충분히 혼합되었는지 확인하십시오.

원본 기록을 바탕으로 전체 희석 계산을 재구성하십시오. 중간 희석 단계를 누락하거나 부피를 잘못 입력하면 크로마토그램이 정상으로 보일지라도 일관된 불일치가 발생할 수 있습니다.

4. 추출 및 여과 조사

명확한 결과가 있다고 해서, 그 자체만으로는 시료 전처리가 적절했음을 입증하는 것은 아닙니다.

식물성 원료의 경우, 지정된 전처리 방법이 시료 매트릭스에서 대상 성분을 적절하게 회수하는지 검토해야 한다. 관련 변수로는 용매 조성, 추출 시간, 온도, 시료 질량 대 용매 부피 비율 등이 포함될 수 있다.

이러한 조건을 그 영향이 확인되지 않은 상태에서 변경하면 결과 간의 비교가 어려워질 수 있습니다.

주사기 필터는 입자 함량뿐만 아니라 그 이상의 요소도 변화시킬 수 있습니다

필터를 선택할 때는 용매와의 호환성, 분석물 회수율, 그리고 필터에서 방출되는 물질에 주의를 기울여야 합니다. 기공 크기만으로는 충분하지 않습니다. 애질런트는 여과 회수율과 화학적 청정도에 대해 설명합니다.

분석법 개발 과정이나 승인된 연구 수행 중에는 다음과 같은 비교가 유용할 수 있습니다:

해당 공법의 목표 성능에 따라 수용 기준을 정의하십시오. 특정 원료에 적합한 막이 다른 원료에서도 똑같이 우수한 성능을 보일 것이라고 가정해서는 안 됩니다.

모든 비교 시료는 분석 시스템과 호환되어야 하며, 단순히 “여과되지 않은” 결과를 얻기 위해 입자가 포함된 시료를 주입해서는 안 된다.

5. HPLC 면적 백분율과 정량 분석의 차이점

주요 피크가 크다는 것은 유용한 정보이지만, 이것이 물질의 품질을 모든 측면에서 입증해 주지는 않습니다.

크로마토그래피 면적 백분율은 특정 조건 하에서 피크에 할당된 검출기 응답의 적분값이 차지하는 비율을 나타냅니다. 정량 분석은 정의된 교정 및 계산 절차를 사용하여 분석물의 양을 추정합니다.

이러한 결과들은 자동으로 상호 교환 가능한 것은 아닙니다.

검출기의 반응은 화합물마다 다르며, 이 방법은 분석물을 관련 간섭 물질로부터 적절하게 분리해야 합니다. 애질런트(Agilent)는 면적 기반 순도 추정법을 설명하는 반면, 머크(Merck)의 방법 개발 지침서는 특이성 및 기타 검증 특성의 중요성을 설명하고 있습니다. 애질런트 순도 추정, 머크 HPLC 분석법 개발.

결과를 비교하기 위해, 다음 사항을 파악할 수 있을 만큼 충분한 정보를 요청하십시오:

• 측정 및 교정 방법.
• 참조 표준의 정체성 및 할당된 값.
• 관련 크로마토그래피 조건.
• 통합 및 계산 규칙.
• 시스템 적합성 결과.
• 보고 기준 및 보정 계수.

분석 방법 및 계산 배경이 없는 크로마토그램만으로는 불일치를 해결할 수 없을 수도 있습니다.

또한 반복 주사와 별도로 조제한 시료를 구분해야 합니다. 한 바이알을 반복하여 주사하는 것은 주로 주사 및 기기의 재현성을 평가하기 위한 것입니다. 시료를 별도로 계량하고 조제하면 절차 초기에 발생한 변동성을 평가하는 데 도움이 됩니다.

6. 기준 표준물질 및 용액 이력을 확인하십시오.

두 실험실에서 비슷한 장비를 사용하더라도, 사용하는 표준물질이나 용액이 다르면 서로 다른 결과를 얻을 수 있다.

기준 물질의 문서, 할당된 값, 보관 조건 및 적용 가능한 유효 기간을 검토하십시오. 필요한 보정이 일관되게 적용되었으며, 중복 계상되지 않았는지 확인하십시오.

그런 다음 준비된 용액을 관찰해 보십시오:

• 이들은 정해진 안정성 기간 내에 분석되었습니까?
• 보관 조건은 적절했나요?
• 증발이 가능했을까?
• 눈에 띄는 강수나 그 밖의 변화가 관측되었습니까?
• 표준물질과 시료는 해당 방법에 따라 일관되게 처리되었습니까?

이러한 질문들은 비교 대상이 단순히 동등한 계기 설정에 그치는 것이 아니라, 동등한 해결책인지 여부를 파악하는 데 도움이 됩니다.

7. 유용한 문서 패키지 요청하기

효율적인 공급업체 협의는 정확한 요청에서 시작됩니다.

식물성 원료의 경우, 해당 로트에 대한 최신 사양서 및 COA와 함께 보고된 결과를 해석하는 데 필요한 충분한 분석 방법 정보를 요청하십시오. 원료를 검토 중인 구매자는 롱창 추출물  문서 및 샘플을 요청할 때 다음 체크리스트를 활용할 수 있습니다.

간결한 요청문은 다음과 같을 수 있습니다:

제안된 로트에 대한 최신 사양서 및 COA를 제출해 주시기 바랍니다. 여기에는 분석 방법 참조 정보, 보고 기준 및 기준 물질 정보가 포함되어야 합니다. 당사의 입고 검사와의 비교를 뒷받침하기 위해, 가능한 경우 관련 시료 전처리, 계산 및 크로마토그래피 정보도 함께 제공해 주시기 바랍니다.

모든 공급업체가 자사의 독점적인 공정을 완전히 공개할 수 있는 것은 아닙니다. 당면한 목표는 의미 있는 기술적 비교를 할 수 있을 만큼 충분한 정보를 확보하는 것입니다.

8. 무언가가 통과할 때까지 테스트하지 않고 차이점을 조사한다

차이가 여전히 존재할 경우, 문서화된 조사 절차에 합의하십시오.

원본 결과와 기록을 보존하십시오. 계산 내용과 작성 내역을 확인한 후, 보고 기준의 차이, 필터 관련 손실, 불완전한 추출 등 구체적인 가설에 근거하여 향후 수행할 작업을 선정하십시오.

향후 취할 수 있는 조치로는 독자적인 준비 작업, 적절히 보관된 시료에 대한 재검사, 또는 합의된 방법에 따른 비교 검사를 진행하는 것 등이 있습니다. 추가 검사는 해당 실험실의 품질 관리 절차에 따라 수행되어야 하며, 재검사 결과가 양호하다고 해서 원래의 결과가 자동으로 무효화되는 것은 아닙니다.

조사 범위는 결정 사항에 상응하는 수준으로 유지해야 합니다. 분석 결과의 불일치를 확인한다고 해서, 시료의 정체, 오염 물질 또는 의도된 용도에 대한 적합성 등 이와 별개의 문제들이 해결되는 것은 아닙니다.

가장 유용한 결과는 증거를 바탕으로 그 차이점을 문서화한 설명과, 해당 자료를 수용하거나 거부하거나 추가적으로 평가할 수 있는 명확한 근거를 제시하는 것입니다.